波士頓液相色譜柱是昂貴的色譜耗材,是液相色譜儀的心臟,有著嚴(yán)格的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和測試程序,為了充分發(fā)揮色譜柱的性能,一定程度延長色譜柱的使用壽命,請仔細(xì)閱讀此部分。
安裝:
為了保證色譜柱使用時(shí)有最高柱效,連接管路盡量使用適合的細(xì)徑管路,色譜柱進(jìn)出口的連接必須非常適配,連接管端口部分必須平整,不能有毛刺和切口斜面等現(xiàn)象,各種連接管路請使用專業(yè)工具切割修整;
1、取出色譜柱,仔細(xì)查看柱身洗脫液流向箭頭標(biāo)識,用手旋下柱兩端的塑料堵頭,放好色譜柱,使洗脫液流向和柱身所示流向一致;
2、用手將“連接管路的不銹鋼或者其它材質(zhì)的接頭”旋入色譜柱兩端,管路接頭要和色譜柱接口連接緊密,確保零死體積連接,在色譜儀正常運(yùn)行時(shí)沒有漏液。
色譜柱的正確使用:
色譜柱是昂貴的色譜耗材,正確的使用和維護(hù)對保證色譜柱的正常使用和延長壽命至關(guān)重要。
1、色譜柱使用前注意事項(xiàng):
1)、色譜柱內(nèi)的存儲液:
色譜柱的存儲液,如沒有特殊說明均為質(zhì)檢報(bào)告中所述流動(dòng)相,氨基(NH2)、氰基(CN)、硅膠柱(SiO2)均為正相條件–正己烷/異丙醇體系,反相柱(C1、C4、C8、C18、苯基Phenyl)均為甲醇/水體系,檢測前,請用相互溶的試劑將其替換;
2)、新色譜柱的平衡:
新反相色譜柱:用純甲醇沖洗色譜柱30個(gè)柱體積,再更換成能與檢測流動(dòng)相互溶的流動(dòng)相沖洗30個(gè)柱體積,最后用流動(dòng)相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn);
新的正相色譜柱:用異丙醇0.5ml/min沖洗30個(gè)柱體積,再更換成檢測流動(dòng)相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn);
2、色譜柱的使用方向:
高效波士頓液相色譜柱標(biāo)簽上的箭頭方向?yàn)榱鲃?dòng)相流向,使用過程時(shí)也按此方向,避免雙向混用,導(dǎo)致兩端填料同時(shí)污染,不利于色譜柱的再生和維護(hù);
3、流動(dòng)相和樣品保持潔凈:
由于懸浮在樣品或流動(dòng)相中的細(xì)小顆粒會堵塞色譜柱兩端的篩板,各種試劑盡量使用色譜純級的,用量少的試劑純度至少是分析純,水最好是超純水和全玻璃器皿雙蒸水,使用前建議用0.45μm的濾膜過濾;樣品溶液使用針筒過濾;
樣品中的雜質(zhì)是造成色譜柱污染、柱效下降的最主要原因之一,復(fù)雜樣品可選樣品預(yù)處理柱(SPE柱)進(jìn)行樣品處理,如果不方便處理,最好使用相匹配的保護(hù)柱,樣品溶劑與流動(dòng)相要相匹配,不能出現(xiàn)樣品不互溶,極性相差太大等想象,否則會造成色譜峰形變差,鬼峰等現(xiàn)象,使用流動(dòng)相溶解樣品能有效的避免上述情況發(fā)生;
4、色譜柱允許使用的pH范圍:
每款色譜柱都有自己特定允許使用的pH范圍,請仔細(xì)對照你的色譜柱的使用pH范圍,在pH范圍以外使用,會使硅膠基質(zhì)溶解或鍵合相水解,對色譜柱造成不可恢復(fù)的損傷,如果在臨界pH處使用,分析結(jié)束后立即用適合于色譜柱保存并與當(dāng)前使用的流動(dòng)相互溶的淋洗液置換掉。
5、PAH專用色譜柱使用注意事項(xiàng):
PAH專用色譜柱是針對歐盟76/769/EEC號環(huán)保指令專門設(shè)計(jì)開發(fā)的專用色譜柱,同時(shí)分離16種多環(huán)芳烴物質(zhì),是一類含有一個(gè)苯環(huán)以上的芳香化合物,為了保障色譜柱的分離能力,請盡量專柱專用